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如何测定过氧化氢的含量

作者:小编 日期:2020-11-09 09:15:20 点击数:

过氧化氢是一种无机化合物,化学式为H2O2。纯过氧化氢是淡蓝色的黏稠液体,与水的溶液俗称双氧水。那么过氧化氢含量的测定方法都有哪些呢?小编在这里为大家整理了一些资料,感兴趣的同学一起来看看吧!

过氧化氢含量的测定方法

二甲酚橙法:原理:过氧化氢氧化二价铁离子产生三价铁离子,二甲酚橙高选择性的结合三价铁离子形成有色(紫色)产物,可用比色法在580nm处测定。从而实现对过氧化氢浓度的测定。

由于二甲酚橙作为一种金属离子络合指示剂,与三价铁离子的结合有很高的选择性,也就是该方法有很好的特异性。同时该反应需要在酸性条件下进行,可以消除很多物质的干扰。

硫酸钛比色法:原理:H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在 415nm 有特征吸收。该方法原理简单易懂,但样本处理需要自备丙酮用来破碎细胞、匀浆组织和稀释液体样本。丙酮易挥发,而且易燃有毒,给操作带来一定困难,需要做好防护措施。

探针法:原理:在辣根过氧化物酶(HRP)存在的条件下,特异的 探针与过氧化氢反应,生成有色产物在570nm有最大光吸收,也可产生红色荧光(Ex/Em=535/587 nm)。比色法与荧光法灵敏度不同,需要配制不同的标准曲线。该方法需要用到特异性的荧光探针,反应原理较前面2种复杂,但灵敏度很高,在荧光法中灵敏度可达40 nM。

过氧化物酶底物法:原理:用一种独特的过氧化物酶底物测定溶液和细胞提取物中的过氧化氢 ,在辣根过氧化物酶(HRP)存在的条件下,过氧化氢氧化无色的过氧化物酶底物,产生强烈的蓝色。在 650nm有特征吸收。


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